Yağda həll olunan komponentlərin antioksidant fəaliyyətinin təyini üsulları. RGMU bülleteni - RGMU bülleteni - arxiv


İxtira qida sənayesinə aiddir və ümumi antioksidant fəaliyyətini təyin etmək üçün istifadə edilə bilər. Metod aşağıdakı kimi həyata keçirilir: analit 0,006 M Fe(III) - 0,01 M o-fenantrolin reagenti ilə qarşılıqlı təsir göstərir. Askorbin turşusu (AA) 1:100 nisbətində əlavə edilən eyni reagentlə reaksiya verir. Sonra, ən azı 90 dəqiqə inkubasiya edin və 510 ± 20 nm-də fotometr edin. Bundan sonra analitik siqnalın böyüklüyünün maddənin miqdarından asılılığı müəyyən edilir və ümumi AOA-nın dəyəri hesablanır. Təqdim olunan metod bitki materiallarının və onların əsasında qida məhsullarının ümumi antioksidant fəaliyyətini daha az əmək tutumlu və daha etibarlı müəyyən etməyə imkan verir. 2 maaş f-ly, 1 ill., 5 masa.

İxtira analitik kimyaya aiddir və onun əsasında bitki materiallarının və qida məhsullarının ümumi antioksidant aktivliyinin (AOA) müəyyən edilməsində istifadə edilə bilər.

Məhsulun sulu ekstraktlarının elektriklə əmələ gələn brom birləşmələri ilə qarşılıqlı təsirinə əsaslanan çayın ümumi AOA-sını təyin etmək üçün məlum kulometrik üsul mövcuddur (İ.F.Abdulin, E.N.Turova, G.K.Budnikov. Çay ekstraktlarının elektriklə antioksidant qabiliyyətinin kulometrik qiymətləndirilməsi. yaranan brom // Kimya jurnalı 2001. T.56. S.627-629). Elektrogenerasiya edilmiş brom birləşmələrinin titrant kimi seçilməsi onların müxtəlif reaksiyalara girmək qabiliyyəti ilə bağlıdır: radikal, redoks, elektrofil əvəzetmə və çoxlu bağlarda əlavə. Bu bizə antioksidant xüsusiyyətlərə malik olan bioloji aktiv çay birləşmələrinin geniş spektrini əhatə etməyə imkan verir. Bu metodun çatışmazlıqları antioksidant olmayan maddələrlə bromlaşma reaksiyasının mümkünlüyü və nəticədə ümumi AOA-nın elektrik enerjisi vahidlərində (kC/100 q) ifadə edilməsidir ki, bu da alınan nəticələrin qiymətləndirilməsini çətinləşdirir.

Civə plyonka elektrodunda 0,0 ilə -0,6 V arasında potensial diapazonda oksigenin elektroreduksiya cərəyanının nisbi dəyişməsi ilə ümumi antioksidant aktivliyi təyin etmək üçün məlum voltametrik üsul mövcuddur (Pat. 2224997, Pat. Rusiya, IPC 7 G 01 N 33/01 antioksidantların ümumi aktivliyini təyin etmək üçün voltametrik üsul / Korotkova E.I., Karbainov Yu.A - ərizə No 06.2002; Bu metodun dezavantajı ondan ibarətdir ki, yan elektrokimyəvi reaksiyalar baş verir, bunun nəticəsində antioksidantların təyin edilməsinin effektivliyi azalır, bu da nəticələrin etibarlılığının azalmasına səbəb olur.

Spektrofotometrik və ya kimilüminesans aşkarlama ilə malonaldehidə lipid peroksidləşməsi yolu ilə profilaktik və müalicəvi antioksidantların ümumi AOA-nın monitorinqi üçün məlum üsul mövcuddur (Pat. 2182706, Rusiya, IPC 7 G 01 N 33/15, 33/52. Monitorinq metodu profilaktik və terapevtik antioksidant fondlarının antioksidant fəaliyyəti / Pavlyuchenko I.A., Fedosov S.R - no 2001101389/14; Üstəlik, antioksidant fəaliyyət lipid peroksidləşmə məhsullarının səviyyəsi ilə tərs mütənasibdir. Bu metodun dezavantajı təhlil edilən obyektlərin məhdud diapazonu hesab edilə bilər, çünki bu şərtlərdə yalnız bir antioksidan qrupu müəyyən edilir - lipidlər.

Bitki ekstraktının ümumi AOA-nı təyin etmək üçün məlum bir üsul mövcuddur ki, bu da ekstraktın linetol və dəmir (II) sulfat ilə inkubasiya edilməsindən, UV şüalanması ilə oksidləşmə reaksiyasının başlamasından və Triton X- varlığında tiobarbiturik turşu ilə sonrakı qarşılıqlı təsirdən ibarətdir. 100 (Tətbiq 97111917/13, Rusiya, IPC 6 G 01 N 33/00. Ümumi antioksidant aktivliyin müəyyən edilməsi üsulu / Roqozhin V.V. - Ərizə 07/08/1997; Spektrofotometriya apararkən 7:3 nisbətində etanol və xloroform qarışığından istifadə olunur. Bioloji materialın AOA dəyəri ekstraktı olan nümunədə reaksiya məhsulunun - malondialdehidin yığılmasının prooksidantla nümunəyə nisbəti ilə müəyyən edilir. Bu metodun dezavantajı UV şüalanması zamanı yan reaksiyaların baş vermə ehtimalıdır ki, bu da əldə edilən analiz nəticələrinin etibarlılığını azaldır.

Ümumi AOA-nın müəyyən edilməsi üçün sadalanan üsullar bir sıra çatışmazlıqlara malikdir: yüksək əmək intensivliyi, aşağı etibarlılıq, ümumi AOA-nın ölçülmüş dəyəri heç bir ümumi qəbul edilmiş maddə ilə əlaqəli deyil və müqayisə olunmur.

İddia edilən ixtiraya ən yaxın analoq, oksidləşdirici maddə hidrogen peroksidin (M.X.Navas, A.M.Ximinets, A.G.Azuero) iştirakı ilə luminol ilə reaksiya zamanı baş verən kimilüminesansın ölçülməsi yolu ilə dərman bitkilərinin ümumi AOA-nın müəyyən edilməsi üsuludur. Kanarya toxumlarının tinctures-in kimyalüminessensiya ilə təyini // Analitik kimya jurnalı 2004. T.59. üçün kəmiyyət göstəricisiümumi AOA dərman xammalının ekstraktının azaldılması qabiliyyətini və güclü antioksidantın fəaliyyətini müqayisə etdi - askorbin turşusu 25-110 mkq miqdarda. Sadalanan üsullarla müqayisədə prototipdə hidrogen peroksid oksidləşdirici agent kimi geniş spektrli antioksidantlarla qarşılıqlı əlaqədə olur və obyektin ümumi AOA-nın ölçülmüş dəyəri müəyyən edilir və askorbin turşusuna nisbətən ifadə edilir. əldə etməyi mümkün edən ümumi qəbul edilmiş antioksidantdır etibarlı nəticələr digər çatışmazlıqları qoruyarkən. Dezavantajlara metodda istifadə olunan avadanlıqların mürəkkəbliyi də daxildir.

İddia edilən ixtiranın texniki məqsədi onun əsasında bitki materiallarının və qida məhsullarının ümumi antioksidant fəaliyyətini təyin etmək üçün daha az əmək tutumlu və etibarlı metod hazırlamaqdır.

Texniki problemi həll etmək üçün analitin 0,006 M Fe(III) - 0,01 M o-fenantrolin reagenti və 1:100 nisbətində əlavə edilən eyni reagentlə askorbin turşusu (AA) ilə qarşılıqlı təsirə salınması təklif olunur. , ən azı 90 dəqiqə inkubasiya edilmiş, 510±20 nm-də fotometrləşdirilmiş, sonra analitik siqnal dəyərinin maddənin miqdarından asılılığının müəyyən edilməsi və ümumi AOA-nın dəyərinin hesablanması. Xüsusilə, hesablama tədqiq olunan obyekt və askorbin turşusu arasındakı kəmiyyət uyğunluğu tənliyindən əldə edilən (I) düsturundan istifadə etməklə həyata keçirilə bilər:

burada a, b analitik siqnalın AC miqdarından asılılığı üçün reqressiya tənliyindəki əmsallardır;

a", b" - analitik siqnalın tədqiq olunan obyektin miqdarından asılılığı üçün reqressiya tənliyində əmsallar;

x günəş - tədqiq olunan reduksiyaedicinin (nümunənin) kütləsi, mq.

Təklif olunan reagentin istifadəsi müəyyən şərtlər xətti diapazonu genişləndirməyə və aşkar edilən askorbin turşusunun aşağı həddini azaltmağa imkan verdi. Təklif olunan əsas xüsusiyyətlər toplusu onların əsasında geniş çeşiddə bitki materiallarının və qida məhsullarının ümumi AOA-nı müəyyən etməyə imkan verir.

Kəmiyyət uyğunluğu tənliyi analitik siqnalın askorbin turşusunun miqdarından asılılığını və bərabər antioksidant aktivlik şərti ilə analitik siqnalın sınaq obyektinin miqdarından asılılığını birləşdirir.

Ən kiçik kvadratlar metodundan istifadə etməklə analitik siqnalın böyüklüyünün fotometrik ölçülərinin nəticələrini emal etdikdən sonra (K.Derffel Statistics in analytical chemistry. – М.: «Мир», 1994. С.164-169; A.K.Çarıkov Nəticələrin riyazi emalı. kimyəvi analiz- L.: Chemistry, 1984. S.137-144) bu asılılıqlar xətti reqressiya funksiyası ilə təsvir edilmişdir: y=ax+b, burada a reqressiya əmsalı, b sərbəst şərtdir. Reqressiya tənliyində a əmsalı tangensə bərabərdir düz xəttin x oxuna meyl bucağı; əmsalı b - y oxu boyunca başlanğıcdan (0,0) birinci nöqtəyə qədər olan məsafə (x 1, y 1).

a və b əmsalları düsturlarla hesablanır:

Müəyyən bir zamanda AC-nin askorbin turşusunun miqdarından asılılığı üçün reqressiya tənliyi formaya malikdir:

y AK = a x AK (mg) + b,

AC-nin öyrənilən obyektin (azaldıcı agent) miqdarından asılılığı üçün reqressiya tənliyi:

y VOST =a" x VOST (mq)+b",

burada AK-də, VOST-da fotometrlənmiş məhlulun optik sıxlığı;

x AA (mq), x VOST (mg) - məhlulda askorbin turşusunun (azaldıcı agent) konsentrasiyası;

sonra funksiyaların qiymətlərini bərabərləşdirərək, askorbin turşusunun kəmiyyət vahidlərində (mq) öyrənilən obyektin antioksidant fəaliyyətini hesablamaq üçün düstur (I) alırıq.

Çizimdə analitik siqnalın azaldıcı maddənin miqdarından asılılığı göstərilir.

Təhlil edilən məhlulların optik sıxlığı KFK-2MP fotoelektrokolorimetrindən istifadə etməklə ölçüldü.

Tanınır (F. Umland, A. Yasin, D. Tirik, G. Wünsch Kompleks əlaqələr analitik kimyada - M.: Mir, 1975. - 531 s.), o-fenantrolinin dəmir (II) ilə λ = 512 nm-də udma maksimumu ilə xarakterizə olunan qırmızı-narıncı rəngli suda həll olunan xelat əmələ gəldiyi. . Buna görə də təklif olunan üsulda fotometriya λ=510±20 nm-də aparılır.

Reagentin tərkibinin və reaksiyaya daxil edilən kəmiyyətinin optimallaşdırılması hər bir təcrübədə bütün öyrənilən amillərin dəyişdirilməsindən ibarət olan “Latın kvadratı” metodundan istifadə etməklə multifaktorial eksperimental planlaşdırmanın nəticələri əsasında həyata keçirilmişdir. hər bir faktor yalnız bir dəfə digər amillərin müxtəlif səviyyələrində baş verir. Bu, tədqiq olunan hər bir amilin yaratdığı təsiri ayrıca təcrid etməyə və qiymətləndirməyə imkan verir.

Faktorlar bunlar idi: Fe(III), o-fenantrolinin miqdarı və reaksiyaya daxil olan reagentin həcmi. Faktorların birləşməsi bir tərəfdən kifayət qədər həssaslıqla analitik siqnalın (AS) geniş xəttini, digər tərəfdən isə reaktivin zamanla sabitliyini təmin etməlidir. Bu, hər bir amil üçün aşağıdakı səviyyələri müəyyən etməyə imkan verdi:

Fe(III) miqdarı: 0,003 M (A 1); 0,006 M (A 2); 0,009 M (A 3);

o-fenantrolinin miqdarı: 0,01 M (B 1); 0,02 M (B 2); 0,03 M (B 3);

reagentin həcmi: 0,5 ml (C 1); 1,0 ml (C 2); 2,0 ml (C 3) (Cədvəl 1).

Seçim üçün optimal birləşmə amillərin səviyyələri, AC-nin askorbin turşusunun miqdarından 10 ilə 150 ​​μg aralığında kalibrləmə asılılıqları əldə edildi (bu, funksiyanın xəttini təsdiqləmək üçün lazımdır), nəticədə asılılığın reqressiya tənliyi hesablandı və sonra verilmiş miqdarda (120 μg) askorbin turşusunda AC dəyəri hesablanmışdır. Beləliklə, hər bir reagent tərkibi (A, B faktorları) üçün AC dəyərinin maksimum olduğu həcm (əmsal C) seçilmişdir. Bu, nəzərə alınan birləşmələrin sayını doqquza endirməyə imkan verdi (Cədvəl 2).

Hər səviyyə üçün ümumi AC-ni müqayisə edərək, maksimum dəyəri olan məbləğlər müəyyən edilmişdir: ΣA 2 (0,991); ΣB 1 (1,066); ΣC 2 (1.361). Bu, optimal reagent tərkibinin belə olduğu qənaətinə gəlməyə imkan verdi: 0,006 M Fe(III) - 0,01 M o-fenantrolin, 100 ml məhlul üçün 1,0 ml reaksiyaya daxil edilir.

Reagentin optimal konsentrasiyasında, reaksiya qarışığının müxtəlif inkubasiya müddətlərində AC-nin askorbin turşusu və təbii obyektlərdə ümumi olan bəzi reduksiyaedici maddələrin (tannin, rutin, quercetin) konsentrasiyasından asılılığının dəyişməsini öyrəndik (30, 60). , 90, 120 dəq). Müəyyən edilmişdir ki, tədqiq olunan bütün reduksiyaedicilər üçün AC-nin onların tərkibindən asılılığı 10-150 μg diapazonunda xəttidir (şərtiyə bax), AC-nin qiyməti isə inkubasiya müddətindən asılıdır (cədvəl 3).

Rəsmdən görünür ki, rutinin təsiri altında AC dəyişməsi əhəmiyyətsizdir, tanin yaxınlaşır və quercetin askorbin turşusundan oxşar asılılığı üstələyir. Bütün tədqiq olunan reduksiyaedici maddələrin inkubasiya müddətindən asılı olaraq AS-nin dəyişməsini nəzərdən keçirərkən (cədvəl 3) müəyyən edilmişdir ki, analitik siqnalın zamanla sabitləşməsi 90 dəqiqədən müşahidə olunur.

Cədvəl 3

Zamanla azaldıcı maddələrin AC dəyişməsi

Test maddəsim maddə, mq/sm 3Analitik siqnal
Reaksiya qarışığının inkubasiya müddəti, dəq
30 60 90 120
Askorbin turşusu10 0,038 0,042 0,044 0,044
100 0,340 0,352 0,360 0,363
Tannin10 0,029 0,037 0,042 0,043
100 0,280 0,295 0,303 0,308
Rutin10 0,013 0,016 0,019 0,019
100 0,150 0,166 0,172 0,175
Quercetin10 0,031 0,044 0,051 0,053
100 0,420 0,431 0,438 0,442

Müəyyən edilmiş AOA dəyərinin summativ xarakterini sübut etmək üçün Fe (III) reagentinin - o-fenantrolinin reduksiyaedici maddələr: tanin, rutin, quercetin və müxtəlif nisbətlərdə askorbin turşusu olan model məhlullara təsiri öyrənilmişdir. Cədvəl 4 model qarışıqlarının təhlilinin nəticələrini təqdim edir.

Cədvəl 4

Model qarışıqlarının təhlilinin nəticələri (P=0,95; n=3)

Qarışıqdakı komponentlərin sayıÜmumi AOA, hesablanmış, µgACÜmumi AOA, tapılmış, µgAC
təqdim etdiAK baxımından
AKTanninRutinQuercetinAKTanninRutinQuercetin
- 20 20 20 - 16,77 9,56 32,73 59,06 57,08
- 10 10 10 - 8,35 4,77 16,41 29,53 26,95
- 50 10 10 - 42,02 4,77 16,41 63,20 55,04
- 10 50 10 - 8,35 23,93 16,41 48,69 50,06
- 10 10 50 - 8,35 4,77 81,70 94,82 91,61
- 30 10 10 - 25,19 4,77 16,41 46,37 39,24
- 10 30 30 - 8,35 14,35 49,06 71,76 73,47
20 20 20 20 20 16,77 9,56 32,73 79,06 96,29
50 10 10 10 50 8,35 4,77 16,41 87,95 93,07
10 50 10 10 10 42,02 4,77 16,41 73,20 78,15
10 10 50 10 10 8,35 23,93 16,41 58,69 78,74
10 10 10 50 10 8,35 4,77 81,70 104,82 121,45
30 30 10 10 30 25,19 4,77 16,41 76,37 84,59
10 10 30 30 10 8,35 14,35 49,06 81,76 103,31

Ümumi AOA-nın nəzəri dəyərinin hesablanması bərabər antioksidant aktivlik şəraitində öyrənilən reduksiyaedicinin askorbin turşusuna münasibətdə antioksidant qabiliyyətini xarakterizə edən kəmiyyət uyğunluq tənliklərindən istifadə etməklə aparılmışdır: .

Eksperimental (tapılmış) AOA-nın dəyəri AC-nin askorbin turşusunun miqdarından asılılığı üçün orta reqressiya tənliyindən istifadə etməklə hesablanmışdır. Cədvəl 4-də təqdim olunan nəticələrdən aydın olur ki, eksperimental olaraq əldə edilmiş AOA dəyərləri nəzəri hesablanmışlarla qənaətbəxşdir.

Beləliklə, müəyyən edilmiş AOA dəyəri ümumi göstəricidir və kəmiyyət uyğunluq tənliklərindən istifadə etməklə onun dəyərinin müəyyən edilməsi düzgündür.

Təklif olunan üsul real nümunələr üzərində sınaqdan keçirilmişdir. Həqiqi nümunənin və ya onun ekstraktının ümumi AOA-nı müəyyən etmək üçün AC-nin analit və askorbin turşusunun miqdarından kalibrləmə asılılığı reaksiya qarışığının ən azı 90 dəqiqəlik inkubasiya müddəti ilə əldə edilmişdir. Ümumi AOA-nın hesablanması (I) düsturuna əsasən aparıldı və sınaq obyektinin qramı üçün mq askorbin turşusu ilə ifadə edildi (mgAA/q).

Təklif olunan metodun düzgünlüyünü təsdiqləmək üçün bu nümunələr məlum üsullarla sınaqdan keçirilmiş, tərkibində askorbin turşusu (QOST 24556-89 Meyvə və tərəvəzlərin emal məhsulları. C vitamininin təyini üsulları) və üstünlük təşkil edən azaldıcı maddələr: çayda tanin miqdarı qiymətləndirilmişdir. (QOST 19885-74 Çay. Məzmun tannin və kofeinin təyini üsulları), itburnuda - üzvi turşuların miqdarı (GOST 1994-93 İtburnu. Spesifikasiyalar) (Cədvəl 5).

1 Milentyev V.N. 2Sannikov D.P. 3Kazmin V.M. 2

1 Federal Dövlət Büdcə Ali Peşə Təhsili Təşkilatı "Orlovski" dövlət institutu iqtisadiyyat və ticarət”

2 Federal Dövlət Büdcə Müəssisəsi "Orlovski" Kimyalaşdırma və Kənd Təsərrüfatı Radiologiya Mərkəzi

3 Federal Dövlət Büdcə Ali Peşə Təhsili Təşkilatı " Dövlət Universiteti– təhsil, elmi-tədqiqat və istehsalat kompleksi”

Qida maddələrinin antioksidant fəaliyyətini qiymətləndirmək üçün kimilüminesansdan istifadənin mümkünlüyü tədqiq edilmişdir. Təklif olunan metod lüminolun qələvi mühitdə kimilüminesansına əsaslanır, onun intensivliyi kimilüminesans nümunəsindəki peroksidlərin miqdarından asılıdır. Kimilüminesans dozaj nasosu, işıq keçirməyən kamera, şüşə vakuum fotoçoxaltıcı və kompüter sistemindən ibarət inkişaf etmiş qurğu vasitəsilə qeydə alınıb. Kimilüminesansı artırmaq üçün luminola kalium dəmir sulfid məhlulu əlavə edildi. Kimilüminesans intensivliyindəki dəyişikliklər təhlil edilən nümunənin luminol məhluluna daxil edilməsi anında qeydə alınıb. Təhlil edilən nümunə kimi aşağı temperaturda quru distillə yolu ilə alınmış zəncəfil ekstraktı istifadə edilmişdir. Tərkibində yüksək antioksidant fəaliyyəti ilə tanınan fenolik birləşmələr var. Müəyyən edilmişdir ki, müxtəlif qida birləşmələrinin antioksidant xüsusiyyətlərini təyin etmək üçün kimilüminesans üsulundan istifadə etmək olar.

kimyalüminesans

antioksidant fəaliyyət

peroksidlər

qida maddələri

1. Vasiliev R.F. Kimyəvi parıltı // Kimya və kimyaçılar, 01.21.10. – URL: http://chemistry-chemists.com. (giriş tarixi: 08/22/13).

2. Vladimirov Yu.A. Sərbəst radikallar və antioksidantlar // Vestn. RAMS. – 1998. – No 7. – S. 43–51.

3. Kondraşova E.A. Kimilüminesans ferment immunoassayının ən həssas üsulu kimi və onun tətbiqi // Klinik laboratoriya diaqnostikası. – 1999. – No 9. – S. 32.

4. Lyubimov, G.Yu. Kimilüminesans analizi // İmmunologiya. – 1991. – No 1. – S. 40–49.

5. Mayansky A.N., Nevmyatullin A.L., Chebotar I.V. Faqositoz sistemində reaktiv kimilüminesans // Mikrobiologiya. – 1987. – No 1. – S. 109–115.

6. Şerstnev M.P. Hüceyrə kemilüminesansının yaranması üçün kalsiumdan asılı və kalsiumdan asılı olmayan yollar // Kimilüminesans sualları. – 1991. – No 2. – S. 1–4.

Bu gün kimyalüminessensiya kimya, fizika və biologiyanın kəsişməsində yerləşən geniş bir elm sahəsini təmsil edir. Kimiluminesans ilə kimyəvi enerjinin birbaşa elektromaqnit vibrasiya enerjisinə çevrilməsi baş verir, yəni. dünyaya Kimilüminesansdan istifadə edərək, reaksiyanın necə getdiyini, onun mexanizminin nə olduğunu, texnoloji proseslərin effektiv və səmərəli həyata keçirilməsi üçün nəyin lazım olduğunu öyrənə bilərsiniz. Kimyəvi məhsulun istehsalının texnoloji prosesi kimilüminesans ilə müşayiət olunursa, onun intensivliyi prosesin sürətinin ölçüsü kimi xidmət edə bilər: reaksiya nə qədər sürətli olarsa, parıltı da bir o qədər parlaq olur. Kimilüminesans reaksiyası zamanı enerji ilə zəngin məhsullar əldə edilir, daha sonra işıq saçmaqla enerjini buraxır, yəni kimyəvi enerji enerjiyə çevrilir. elektromaqnit şüalanma.

Tədqiqatın məqsədi qida maddələrinin antioksidant fəaliyyətini qiymətləndirmək üçün kemilüminesansdan istifadə imkanlarını araşdırmaqdır.

Tədqiqat nəticələri və müzakirə

Qida maddələrinin antioksidant fəaliyyətinin qiymətləndirilməsi problemi çox aktualdır. Müəyyən bir məhsulun faydalılığını göstərmək üçün "antioksidant fəaliyyət" termininin istifadəsi çox vaxt heç bir kimyəvi və ya biokimyəvi arqumentasiya olmadan həyata keçirilir. Bir qayda olaraq, hər hansı bir maddənin antioksidant fəaliyyəti peroksidin dəyərinin azaldılmasının effektivliyi deməkdir. Peroksid sayı anlayışının özü də onun kimyəvi mahiyyətini tam açmır, çünki bu və ya digər maddələr mübadiləsi mərhələlərinin kinetikası və termodinamikasına tam uyğun gəlmir. qida məhsulu. Bundan əlavə, bu dəyər yağlar şəklində lipidləri xarakterizə etmək üçün istifadə olunur. Bununla belə, orqanizmdə oksidləşmə və peroksidlərin əmələ gəlməsi prosesləri təkcə yağları istehlak edərkən deyil, həm də digər qidalar qəbul edərkən baş verir. Başqa sözlə, müəyyən bir məhsuldakı peroksidin tərkibinin bir növ tərəzidə "çəkili" olduğunu söyləmək olar, burada "istinad çəkisi" peroksidlərlə oksidləşən yodid ionunun turşu mühitində konsentrasiya vahididir. Nəticədə molekulyar yod əmələ gəlir:

I- - e → I; (1)

I + I → I20. (2)

Molekulyar yod natrium tiosulfat olan bir məhlul ilə titrləndikdə, onun konsentrasiyası müəyyən edilir və buna görə də oksidləşdirici yodid ionlarının miqdarı müəyyən edilir, yəni. peroksid birləşmələri, əslində peroksid sayı adlanır. Bu cür "çəkidən" istifadə edərək peroksidin dəyərinin müəyyən edilməsi Şəkil 1-də göstərilən reaksiyaya əsaslanır. 1.

düyü. 1. Natrium tiosulfatdan istifadə edərək peroksidin dəyərinin təyini

Beləliklə, peroksidlərin konsentrasiyası tənlikdən müəyyən edilir

С(I2) = ϒ(C[-O-O-]), (3)

burada ϒ molekulyar yodun konsentrasiyası ilə peroksidlərin konsentrasiyası arasında korrelyasiya əmsalıdır.

Məhsullarda peroksidlərin təyin edilməsi üçün təklif etdiyimiz üsul qələvi mühitdə luminolun (C[lm]) kimilüminesansına əsaslanır ki, onun intensivliyi (Ichl) peroksidlərin (C[-O-O-]) konsentrasiyasından asılıdır. kimyalüminessent nümunə:

IHL = Ϧхл ω, (4)

burada Ϧhl kimilüminesansın kvant məhsuludur; ω - peroksidlərin iştirakı ilə reaksiya sürəti:

khlC[-O-O-] C[lm] = ω, (5)

burada khl reaksiya sürətinin sabitidir və ya:

C[lm] khl Ϧkhl = K, (6)

IHL = K C[ -O-O- ]. (7).

Peroksidlərin miqdarı (-O-O-) işıq cəmi (S) ilə müəyyən edilir:

S-nin dəyəri kimyəviluminesans reaksiyasında peroksidin tam istehlak dərəcəsindən asılıdır.

Sabit K-ni təyin etmək üçün, titrləmə ilə müəyyən edilən işıq miqdarının S peroksidin konsentrasiyasından asılılığı üçün bir kalibrləmə əyrisi qurulur:

S = f(C[-O-O-]). (9)

Hidrogen peroksid H2O2 peroksidlər kimi istifadə olunur.

Sonra (3) və (9) tənliyindən alınan məlumatlar müqayisə edilir. ϒ və K-nin müqayisəsinə əsasən, bu üsullarla peroksidlərin təyin edilməsinin əsasını təşkil edən reaksiya mexanizmlərinin uyğunluğu haqqında nəticə çıxarılır. Məlum oldu ki, bu diapazonda peroksidin konsentrasiyası ϒ və K həqiqətən bir-biri ilə uyğun gəlir və buna görə də onlardan peroksidin sayını təyin etmək üçün istifadə edilə bilər.

Lüminol (5-amino-1,2,3,4-tetrahidro-1,4-ftalazindion, 3-aminoftalik turşu hidrazid, H2L) olan qələvi mühitdə kimyalüminesans müşahidə edilmişdir. Şüşə vakuum fotoçoğaltıcısı da daxil olmaqla kimyalüminessent qurğudan istifadə etməklə qeydə alınıb. Fotoçoğaltıcı kompüter monitorunun displeyində (5) qeydə alınan fotoçoxaltıcı siqnalını gücləndirən bloka (9) qoşulmuş yüksək gərginlikli rektifikatorla (7) qidalanır.

düyü. 2. Təhlil olunan məhsulun kimilüminessensiyasının qeydiyyatı: 1 - dozaj nasosu; 2 - işıq keçirməyən kamera; 3 - güzgü; 4 - kyuvet; 5 - kompüter sistemi; 6 - fotoçoğaltıcı; 7 - yüksək gərginlikli rektifikator; 8 - kimyalüminessent şüalanmanın spektral bölgəsini təyin etməyə imkan verən cihaz; 9 - fotoçoğaltıcı siqnalını gücləndirən blok

Təhlil edilən nümunəni luminolun kimyalüminesans məhlulu olan kyuvetaya (4) daxil etmək üçün dozaj nasosu (1) lazımdır. Bu dispenser kimilüminesans məhlulu ilə vurulan nümunə üçün qarışdırıcı rolunu oynayır. Reaksiya sürətini və kemilüminesans intensivliyini artırmaq üçün luminola kalium dəmir sulfid məhlulu əlavə edildi. Qarışdırma, məhlul mayesindən havanın vurulması ilə əldə edilən hava kabarcıkları ilə həyata keçirilir. İşığa keçirməyən kamerada (2) yerləşən güzgü (3), işıq keçirməyən kamerada quraşdırılmış fotoçoxaltıcının (6) fotokatoduna düşən kimilüminesans şüalanmanın daha yaxşı işıq toplanmasına xidmət edir. Dispenser təcrübələr zamanı işıq keçirməyən kameranı (2) açmadan lazım olan maye komponentləri kyuvetaya daxil etməyə imkan verir. Bu zaman bu mayelər şüşə və ya plastik borular vasitəsilə kyuvetaya (4) daxil olur. Kompüter sistemi parıltı intensivliyinin I-nin t vaxtından, yəni kimilüminesans kinetikasından asılılığını qeyd etməyə imkan verir:

Kompüter sistemi I = f(t) funksiyasında kimilüminesensiyaya səbəb olan reaksiyaların sürət sabitləri ilə, yəni onların kinetikası ilə bağlı olan yüksəlmə və enmə sabitlərini əks etdirir. Kimilüminessent radiasiyanın spektral bölgəsini, yəni asılılığını təyin etməyə imkan verən bir cihaz (8) kimyalüminessent kameraya daxildir:

I = f1(λ). (on bir)

Bu blok, sərhəd filtrlərinin quraşdırıldığı disk formalı bir kasetdir. Filtrlərin dəyişdirilməsi disk kasetini filtrlərin müstəvisinin mərkəzlərini və fotoçoxaltıcının fotokatodunun müstəvisini birləşdirən üfüqi oxa nisbətən fırlanması ilə həyata keçirilir.

Ölçmə prosesi aşağıdakı kimi aparılır:

1. Fotomultiplikatorun onun təchizatı gərginliyinin dəyişməsinə və onun katoduna düşən istinad işıq mənbəyinin intensivliyinin dəyişməsinə reaksiyası müəyyən edilir.

2. Küvet qələvi mühitdə luminol məhlulu ilə doldurulur.

3. Dispenser analiz edilən nümunə ilə doldurulur.

4. Kimilüminesans intensivliyinin t vaxtından asılılığı qeydə alınır. Kimilüminesansın müşahidələri t zamanından I1-in dəyişməsinin minimal olduğu t1 vaxtına qədər aparılır: I1 = f1(t).

5. Təhlil edilən məhlulun bir hissəsi dispenserdən istifadə etməklə verilir.

6. Təhlil edilən nümunənin kinetikası I = f(t) olan kimyəvilüminesans müşahidə edilir.

Şəkildə. Şəkil 3-də təhlil edilən məhlulun tətbiqindən sonra (I = f(t)) qrafiki ilə birləşdirilmiş funksiyaların (I1 = f1(t)) asılılığının qrafiki göstərilir.

Şəkildən göründüyü kimi. 3, luminol chemiluminescence intensivliyi dəyişir: kəskin yüksəliş, təhlil edilən nümunə əlavə edildikdən sonra lüminesansda kəskin azalma ilə müşayiət olunur.

Luminolun oksidləşməsi zamanı kimilüminesansın artması peroksidlərin əmələ gəlməsi ilə əlaqəli olduğundan, analiz edilən nümunənin daxil edilməsindən sonra kimilüminesansın intensivliyinin azalması onların miqdarının azaldığını göstərir. Nəticə etibarilə, təhlil edilən nümunəyə daxil olan birləşmələrdə antioksidant aktivliyin olması haqqında danışmaq olar.

Qeyd edək ki, analiz edilən nümunə yüksək antioksidant aktivliyi ilə tanınan fenolik birləşmələri ehtiva edən aşağı temperaturda quru distillə üsulu ilə əldə edilmiş zəncirotu ekstraktı olub.

düyü. 3. Təhlil olunan məhlulun tətbiqindən sonra (I = f(t)) qrafiki ilə birləşdirilmiş funksiyadan asılılıq qrafiki (I1 = f1(t))

Bundan əlavə, təcrübə müəyyən etdi ki, chemiluminescence istifadə edərək, məsələn, saxlama zamanı məhsulların oksidləşməsinin başlanğıcını qiymətləndirmək üçün vacib olan ultra seyreltilmiş sistemlərdə peroksidlərin miqdarını təyin etmək mümkündür.

Beləliklə, tədqiqatlar göstərdi ki, qələvi mühitdə luminolun kimilüminesensiyasına əsaslanan məhsullarda peroksidlərin təyini üsulu qida maddələrinin antioksidant fəaliyyətini qiymətləndirməyə imkan verir və müxtəlif qida birləşmələrinin antioksidan xüsusiyyətlərini təyin etmək üçün istifadə edilə bilər. .

Rəyçilər:

Litvinova E.V., texnika elmləri doktoru, "OrelGIET" Ali Peşə Təhsili Federal Dövlət Büdcə Təhsil Təşkilatının Texnologiya, Təşkilat və Qida Gigiyenası Kafedrasının professoru, Orel;

Kovaleva O.A., biologiya elmləri doktoru, İnstitutun direktoru, Ali Peşə Təhsili Federal Dövlət Büdcə Təhsil Təşkilatı "Oryol Dövlət Aqrar Universiteti", Orel.

Əsər 8 noyabr 2013-cü ildə redaktor tərəfindən qəbul edilmişdir.

Biblioqrafik keçid

Paniçkin A.V., Bolşakova L.S., Milentyev V.N., Sannikov D.P., Kazmin V.M. QİDA MADDƏLƏRİNİN ANTİOKSİDANT XÜSUSİYYƏTLƏRİNİN QİYMƏTLƏNDİRİLMƏSİ ÜÇÜN KEMİLÜMİNESSENSİYADAN İSTİFADƏ // Fundamental Tədqiqatlar. – 2013. – No 10-11. – S. 2436-2439;
URL: http://fundamental-research.ru/ru/article/view?id=32810 (giriş tarixi: 17/12/2019). “Təbiət Elmləri Akademiyası” nəşriyyatında çap olunan jurnalları diqqətinizə çatdırırıq.

“Arxivi yüklə” düyməsini sıxmaqla sizə lazım olan faylı tamamilə pulsuz yükləyəcəksiniz.
Bu faylı yükləməzdən əvvəl o yaxşı esseləri, testləri, kurs işlərini, tezislər, məqalələr və kompüterinizdə tələb olunmayan digər sənədlər. Bu sizin işinizdir, cəmiyyətin inkişafında iştirak etməli, insanlara fayda verməlidir. Bu işləri tapın və bilik bazasına təqdim edin.
Biz və bütün tələbələr, aspirantlar, bilik bazasından dərslərində və işlərində istifadə edən gənc alimlər Sizə çox minnətdar olacağıq.

Sənədi olan arxivi yükləmək üçün aşağıdakı sahəyə beş rəqəmli nömrə daxil edin və "Arxivi yükləyin" düyməsini basın.

Oxşar sənədlər

    Reaktiv oksigen növlərinin əmələ gəlməsinin fermentativ və qeyri-fermental yollarının öyrənilməsi. Onların canlı hüceyrələrə zərərli təsirinin mexanizmləri, xüsusən də sərbəst radikal lipidlərin peroksidləşməsinin başlanması. Bədənin antioksidant qorunması.

    kurs işi, 01/11/2017 əlavə edildi

    Bitki materiallarının antioksidant fəaliyyəti. Antioksidant fəaliyyəti olan bitkilərin təsviri. Yetişmə dövründə adi viburnumda C vitamininin miqdarının, tərkibindəki polifenol birləşmələrin miqdarının təyini müxtəlif növlərçay.

    dissertasiya, 04/02/2009 əlavə edildi

    Gibberellinlər böyümə və inkişafı tənzimləyən fitohormonların geniş sinfidir: kəşf tarixi, kimyəvi quruluşu, təsnifatı, bitkilərdəki tərkibi. Gibberellinlərin biokimyası, tənzimləyici funksiyaları və bioloji aktivliyi, quruluşu, xassələri.

    təqdimat, 20/10/2014 əlavə edildi

    mücərrəd, 19/05/2017 əlavə edildi

    Brassinosteroidlərin bioloji aktivliyi və kimyəvi quruluşu. Karbon skeletinin qorunması ilə sintez. Brassinosteroidlərin siklik hissəsinə xas olan funksiyaların formalaşması. Yeni karbon-karbon bağlarının formalaşması ilə yan zəncirinin qurulması.

    kurs işi, 12/07/2014 əlavə edildi

    Pankreasın fiziologiyasının öyrənilməsi, mədəaltı vəzi şirəsinin həzm prosesində rolu. Reaktiv oksigen növlərinin və onların əmələ gəlmə yollarının təhlili, sərbəst radikal proseslərin biokimyası. Kəskin pankreatitdə metabolik proseslərin vəziyyətinin nəzərdən keçirilməsi.

    kurs işi, 03/10/2012 əlavə edildi

    Kimyəvi birləşmə Penstemon cinsi və bioloji aktivliyi. Nazik qat xromatoqrafiyasından istifadə etməklə bitki xammalının keyfiyyətcə fitokimyəvi analizi. Yüksək effektiv maye xromatoqrafiyası ilə komponentlərin kəmiyyət tərkibinin təyini.

    praktiki iş, 01/07/2016 əlavə edildi

1 Bolşakova L.S. 1Milentyev V.N. 2Sannikov D.P. 3Kazmin V.M. 2

1 Federal Dövlət Büdcə Ali Peşə Təhsili Təşkilatı "Oryol Dövlət İqtisadiyyat və Ticarət İnstitutu"

2 Federal Dövlət Büdcə Müəssisəsi "Orlovski" Kimyalaşdırma və Kənd Təsərrüfatı Radiologiya Mərkəzi

3 Federal Dövlət Büdcə Ali Peşə Təhsili Təşkilatı "Dövlət Universiteti - Təhsil, Tədqiqat və İstehsalat Kompleksi"

Qida maddələrinin antioksidant fəaliyyətini qiymətləndirmək üçün kimilüminesansdan istifadənin mümkünlüyü tədqiq edilmişdir. Təklif olunan metod lüminolun qələvi mühitdə kimilüminesansına əsaslanır, onun intensivliyi kimilüminesans nümunəsindəki peroksidlərin miqdarından asılıdır. Kimilüminesans dozaj nasosu, işıq keçirməyən kamera, şüşə vakuum fotoçoxaltıcı və kompüter sistemindən ibarət inkişaf etmiş qurğu vasitəsilə qeydə alınıb. Kimilüminesansı artırmaq üçün luminola kalium dəmir sulfid məhlulu əlavə edildi. Kimilüminesans intensivliyindəki dəyişikliklər təhlil edilən nümunənin luminol məhluluna daxil edilməsi anında qeydə alınıb. Təhlil edilən nümunə kimi aşağı temperaturda quru distillə yolu ilə alınmış zəncəfil ekstraktı istifadə edilmişdir. Tərkibində yüksək antioksidant fəaliyyəti ilə tanınan fenolik birləşmələr var. Müəyyən edilmişdir ki, müxtəlif qida birləşmələrinin antioksidant xüsusiyyətlərini təyin etmək üçün kimilüminesans üsulundan istifadə etmək olar.

Qida maddələrinin antioksidant fəaliyyətini qiymətləndirmək üçün kimilüminesansdan istifadənin mümkünlüyü tədqiq edilmişdir. Təklif olunan metod lüminolun qələvi mühitdə kimilüminesansına əsaslanır, onun intensivliyi kimilüminesans nümunəsindəki peroksidlərin miqdarından asılıdır. Kimilüminesans dozaj nasosu, işıq keçirməyən kamera, şüşə vakuum fotoçoxaltıcı və kompüter sistemindən ibarət inkişaf etmiş qurğu vasitəsilə qeydə alınıb. Kimilüminesansı artırmaq üçün luminola kalium dəmir sulfid məhlulu əlavə edildi. Kimilüminesans intensivliyindəki dəyişikliklər təhlil edilən nümunənin luminol məhluluna daxil edilməsi anında qeydə alınıb. Təhlil edilən nümunə kimi aşağı temperaturda quru distillə yolu ilə alınmış zəncəfil ekstraktı istifadə edilmişdir. Tərkibində yüksək antioksidant fəaliyyəti ilə tanınan fenolik birləşmələr var. Müəyyən edilmişdir ki, müxtəlif qida birləşmələrinin antioksidant xüsusiyyətlərini təyin etmək üçün kimilüminesans üsulundan istifadə etmək olar.

Biblioqrafik keçid

Paniçkin A.V., Bolşakova L.S., Milentyev V.N., Sannikov D.P., Kazmin V.M. QİDA MADDƏLƏRİNİN ANTİOKSİDAN XÜSUSİYYƏTLƏRİNİN QİYMƏTLƏNDİRİLMƏSİ ÜÇÜN KEMİLÜMİNESSENSİYANIN İSTİFADƏSİ // Balanslaşdırılmış pəhriz, qida əlavələri və biostimulyatorlar. – 2014. – No 6. – S. 36-37;
URL: http://journal-nutrition.ru/ru/article/view?id=283 (giriş tarixi: 17/12/2019). “Təbiət Elmləri Akademiyası” nəşriyyatında çap olunan jurnalları diqqətinizə çatdırırıq.